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基礎信息Product information

產品名稱：

兔附睪上皮細胞

產品簡介：

兔附睪上皮細胞公司正在出售的產品：neuro-2a+luc小鼠腦神經瘤細胞熒光素酶標記 MIA PaCa-2 (人胰腺癌細胞) 兔視網膜微血管內皮細胞 HERC4 E3泛素蛋白連接酶抗體小鼠骨髓造血干細胞己醛醣酸鹽水解酵素抗體人胰腺上皮細胞磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體

產品型號：

廠商性質：經銷商

訪問量：1248

更新時間：2025-04-09

產品特性Product characteristics

兔附睪上皮細胞

兔附睪上皮細胞

商品屬性：

組織來源	產品規格	細胞形態	貨號
附睪：	5×105cells/T25細胞培養瓶	上皮細胞樣	YS-01X8345

細胞簡介：

兔附睪上皮分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個由曲折、細小的管子構成的器官，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細精管，具體結構主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣，可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養精子的功能，以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子，促進精子的進一步成熟。精子在附睪內獲得運動能力，總共停留8～17天，終達到功能上的成熟。在這個過程中，精子除了自身的因素，還受到附睪微環境的影響，這包括了一系列的物理、化學變化和精子形態的改變。可以說，附睪微環境正常穩定是附睪發揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發生異常，精子則不能成熟，引起不育。附睪上皮含有主細胞、基細胞、亮細胞等幾種類型細胞。基細胞，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分，其形態沒有差別，一般認為是貯備細胞；另一種主細胞，是維持附睪生理功能的物質基礎，在各區段的主細胞形態結構差別很大，這也反映出各區段的生理功能的差異。除上皮細胞外，附睪的管壁組織結構也有規律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發地節律性收縮，而尾部平滑肌就沒有這種特點，僅在射精一瞬間出現強烈的節律收縮。作為負責提供適合精子成熟微環境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能。其中，附睪上皮的電解質和水分的轉運，對保持附睪內合適的離子濃度和酸堿度，為精子成熟提供適宜的環境起著相當重要的作用。睪丸的支持細胞每天能產生大量睪網液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網液，而從附睪排出的只不過幾百微升，也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內。動物實驗表明，結扎輸精管時睪丸不會腫脹，但若結扎睪丸輸出小管，睪丸第二天就會腫脹，這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養附睪上皮細胞對精子的發育、成熟，育，附睪生理基礎功能研究具有重要意義。

原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

實驗室分離的兔附睪上皮采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔附睪上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔附睪上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

兔附睪上皮細胞

細胞傳代及凍存：

細胞傳代步驟

細胞凍存步驟

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

兔附睪上皮細胞